固相萃取——高效液相色谱法测定油脂中的苯并(a)芘

发布日期:2018-01-25

PAHs(多环芳烃)是一类日常生活或工业生产过程中产生的副产物,其中13种PAHs已被明确证实同时具致癌性及基因毒性,具有明显致癌作用。苯并(a)芘属于多环芳烃中毒性最大的一种强烈致癌物。

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食品在加热、烘干及烟熏过程中会产生多环芳烃,欧盟执委会208/2005号文件规定,食品中苯并芘最大限量,其中食用油为2.0µg/kg。我国《GB2762-2017食品中污染物限量》规定,食用油标准不超过10µg/kg。

本方法能够在简单固相萃取条件下,苯并芘含量1µg/kg、2µg/kg、10µg/kg情况下,获得良好的回收率和检测结果。



样品提取

称取2g待测油脂,加入5mL异己烷/甲基叔丁基醚(95:5,v/v)混合物,混匀作为上样液待净化。

SPE净化

                                                                          固相萃取柱:HR-P(聚合物填料),500mg/6mL 玻璃柱 

                                                                         (1)活 化:加入10mL异己烷/甲基叔丁基醚(95:5,v/v)润洗,依次以异己烷/甲基叔丁基醚(95:5,v/v)溶液12mL,

                                                                                异己烷/甲基叔丁基醚(80:20,v/v) 溶液10mL,异己烷/甲基叔丁基醚(50:50,v/v) 溶液10mL清洗固相萃取柱;

                                                                         (2)上 样:将待净化液加入小柱,收集流出液;

                                                                         (3)清 洗:用20mL四氢呋喃分次进行冲洗,收集流出液,合并(2)(3)步骤流出液;

                                                                         (4)重新溶解:将收集的流出液在40℃下减压蒸馏至蒸干,残留物加1mL乙腈溶解;

                                                                         (5)分 析:重新溶解后的溶液,经0.20µm滤膜过滤后,进行HPLC检测分析。

色谱分析条件

                                                                           色谱柱:C18 PAHs 专用柱   4.6 x 250mm

                                                                           流动相:乙腈+水=80+20

                                                                           流   速:1.5mL/min

                                                                           柱   温:35℃

                                                                           进样量:20µL

                                                                           检测器:激发波长为384nm,放射波长406nm

油脂中加标回收结果

经去苯并芘处理的空白油脂中分别添加苯并芘1、2、及10µg/kg,三重复添加实验结果,回收率分别为106.8%、80.3%及83.3%,RSD为12.8%以下(见下表)符合欧盟Directive 2005/10/EC对食品所规范回收率50%~100%。

实验谱图

实验结论

利用HR-P固相萃取柱,以异己烷/甲基叔丁基醚(95:5,v/v)清洗柱管,四氢呋喃洗脱萃取柱,回收率可达80%以上,净化效果也较其他方法佳。该方法不经其他前处理,直接将油脂溶解后,即可净化,且在低浓度时仍有良好的回收率,操作方法适合日常批量检测的需要。

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